Ihre Alternative zu Plasmiden

Mit dem EnClose™ Cell‑free dbDNA Synthesis Kit stellt New England Biolabs nun eine vollständig enzymatische, fermentationsfreie Alternative zu Plasmiden vor.

Das Kit enthält alles, was Sie benötigen, um doppelsträngige DNA mit geschlossenen Enden (dbDNA) mit Ihrer Zielsequenz enzymatisch zu erzeugen.

Dazu werden zwei leistungsstarke Enzyme gekonnt miteinander kombiniert:

• phi29‑XT DNA Polymerase für eine hocheffiziente Rolling‑Circle‑Amplification (RCA)
• TelN Protelomerase, die die RCA‑Produkte teilt und die linearen Enden kovalent schließt

Die Methode wurde so entwickelt, dass sie sich nahtlos in moderne molekularbiologische Workflows integrieren lässt und typische Stolpersteine konventioneller Verfahren umgeht.

Ihre Vorteile im Überblick:

• Schnelle und saubere DNA Synthese ohne Fermentation
• Hohe Ausbeuten bei geringem DNA Input
• Geschlossene DNA Struktur für bessere Stabilität
• Einfach skalierbar von R&D bis zu GMP-Anwendungen
• Ideal bei sensiblen Anwendungen und hohen regulatorischen Anforderungen

Der optimierte Workflow für die zellfreie dbDNA Synthese innerhalb eines Tages sieht wie folgt aus:

Das EnClose Cell-free dbDNA Synthesis Kit enthält einen dbDNA Vektor für die Herstellung Ihrer dbDNA Zielsequenz. Für die Klonierung können Sie verschiedene Methoden einsetzen, darunter klassische Klonierung, NEBuilder HiFi DNA Assembly sowie NEBridge Golden Gate Assembly für komplexe oder repetitive Inserts.

Der zellfreie Workflow ist denkbar einfach gehalten und die gewonnene dbDNA kann direkt für eine in vitro Transkription, die Produktion von LV-Vektoren und AAV-Vektoren oder andere nachgelagerte Anwendungen eingesetzt werden.

Weitere Informationen sowie kostenfreie Testmuster finden Sie hier!